薄层色谱成像系统

导语:适用于中医学、中药学、药检所、疾控中心等领域,快速对薄层色谱成像

薄层色谱法是一种基于混合物组分在固定相和流动相之间的不均匀分配或保留而将其分离的方法。与HPLC不同,TLC将固定相涂铺在栽板上,使之形成均匀的薄层。被分离的样品溶液点加在薄层板下沿的位置,再把下沿向下放入盛有流动相(深度5mm)的密缸中,进行色谱展开,实现混合组分分离。将被展开的组分斑点即色谱谱带,通过适当技术对色谱谱带进行处理可得到定性和定量的检测结果。

它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍,它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。

操作方便只需把薄层板放入仪器中,选择需要的照明模式,几秒总就可以自动获得大小与薄层板一致的最佳图像。仪器功能按照人体工程学设计,操作快捷可靠;

操作流程:

(1)取样:直接从原溶液中取样以检测反应情况,根据反应液性质选择合适的溶剂,如水等,大达到完全溶解的状态后即可进行点样。其他与反应物有关的原料、中间产物应该再取样品前配置好,要注意保持各配置好的待点样溶液浓度接近,否则浓稀差异太大影响最后的分析判断。

(2)点样:用毛细管或玻璃点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边1.0~1.5cm,点样直径一般不大于3mm,最好控制在2mm左右,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜,适当靠近。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

(3)展开:将点好样品的薄层板晾干,最好室温下自然蒸发干;放入盛有展开剂的展开缸中,浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜;密封,展开至所需要距离;一般展开距离8~15cm,但应该根据试剂情况确定,但是一般不低于4cm,取出薄层板。

展开杠如需预先用展开挤预平衡,可在缸中加入适量的展开剂,摇晃至展开四壁均匀涂布后,倒掉,重新加入展开剂。必要时并在壁上贴二条与缸同样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,盖严,使展开缸平衡。

(4)检测:对于有颜色的物质可在展开过程中直接观察,判断反应情况,根据试剂需要选择展开距离。对于无色物质,将展开到所需要距离时取出硅胶板,直接再紫外灯下观测,或者待晾干后在紫外灯下观测。

实验结果:

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